IL CAMPIONE DI SANGUE
Al fine di discutere principalmente le due tecnologiutilizzato per la misurazione degli elettroliti è necessario chiarirequale parte del sangue viene utilizzata per la misurazione.
Un campione di sangue intero è costituito da plasma totale e theerythrocytes. Il plasma totale è costituito da una fase acquosa e un numerodi componenti solidi costituiti da proteine e lipidi. Di solito, i solidi nel plasma costituiscono ca. 7% del volume plasmatico totale.L’acqua rappresenta il 93%. Vedi Fig.1.,
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FIG. 1 |
Gli elettroliti sono presenti solo nell’acqua plasmatica e questo è ciò a cui il corpo sta rispondendo. Quindi è in realtà solo l’acqua plasmawater che è di interesse per la misurazione ofelectrolytes.
Una tecnologia di misurazione risponde al contenuto di elettrolito nell’acqua plasmatica (ISE diretta) e l’altra (ISE indiretta) risponde al contenuto di elettrolito nel volume del plasma totale., Di conseguenza, la distribuzione tra acqua e fase solida è di importanza, in quanto il contenuto proteico e lipidico può variare dal normale e causerà una differenza nei risultati riportati dalle due diverse tecnologie di misurazione.
La tecnologia utilizzata per la misurazione degli elettroliti risponde al contenuto di elettroliti nell’acqua plasmatica e riflette la situazione fisiologica, dando così il risultato più utile per il medico su cui agire. Questa tecnologia come chiamato directISE.,
TECNOLOGIE DI MISURA
Le due diverse tecnologie utilizzate per la misurazione degli elettroliti sono denominate in vari modi nella letteratura; tuttavia, i nomi più utilizzati sono direct ISE e indirect ISE. ISEmeans elettrodi ion-selettivi.
ISE indiretto:
- Misura su un campione totale di plasma (o siero) che è stato diluito con un grande volume di diluente.
- Richiede che il plasma e gli eritrociti siano separati mediante centrifugazione.
- A causa della diluizione, questo metodo misura la concentrazione media nel plasma, cioè, la media ponderata tra la concentrazione nella parte di acqua contenente elettroliti e nella parte di proteine / lipidi senza elettroliti. La concentrazione viene calcolata moltiplicando il risultato con il fattore di diluizione.
- I risultati sono paragonabili alla fotometria a fiamma.
- Questa tecnologia è tipicamente utilizzata nei grandi cosiddetti analizzatori di chimica nel laboratorio centralizzato.
- Il risultato riportato dipende dal contenuto di solidi nel campione.
ISE diretto:
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Misure su un campione di sangue intero o plasma non diluito., Tuttavia, la misurazione effettiva viene eseguita sull’acqua del plasma.
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Quando viene utilizzato sangue intero, non comporta alcuna preparazione del campione.
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Direct ISE misura effettivamente l’attività elettrolitica nell’acqua plasmatica (mmol/kg H2O) piuttosto che “concentrazione nel plasma (mmol/L)”. L’attività elettrochimica degli ioni nell’acqua viene convertita nella concentrazione di lettura da un moltiplicatore fisso (ion-specifico). Questo è accurato solo per una data forza ionica, solitamente scelta per eguagliare 160 mmol/L per il plasma.,
L’uso di questo fattore fisso assicura che l’ISE diretto rifletta l’attività effettiva e clinicamente rilevante, indipendentemente dal livello di proteine e/o lipidi . Questo non è cambiato dal fatto che il risultato è tradizionalmente chiamato “concentrazione”.
Questa conversione si basa sulle raccomandazioni del gruppo di esperti IFCC su pH e gas ematici ed è fatta al fine di evitare la confusione di avere due tipi di risultati elettroliti., -
Questa tecnologia è tipicamente utilizzata negli analizzatori di gas nel sangue e negli analizzatori di elettroliti POC, e questi possono essere collocati sia in laboratorio che in un ambiente point-of-care.
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Il risultato riportato è indipendente dal contenuto di solidi nel campione.
In conclusione, i risultati dei due diversi tipi di analizzatore sono portati a correlare per campioni con un contenuto normale di proteine e lipidi. Questo, ovviamente, richiede tuttole variazioni preanalitiche e analitiche sono eliminate.,
CAMPIONI CON UN CONTENUTO PROTEICO/LIPIDICO ANORMALE
La variazione del contenuto di proteine e lipididalla situazione normale causerà un errore sui risultati elettroliti segnalati dall’ISE indiretto.
In letteratura, è riportato che l’errore è inferiore al 5% quando la concentrazione di trigliceridi è inferiore a 2500 mg/dL(il livello raccomandato è 35-160 mg/dL) . L’impatto degli errori sula misurazione degli elettroliti si applica a tutti gli elettroliti; tuttavia, è più pronunciato sul sodio.,
Esempi di errori susodio dalla letteratura: un errore di 17 mmol/L èreportato con un aumento del contenuto proteico e un errore di 26 mmol / L a causa dell’aumento del contenuto lipidico.
Quando il contenuto solido si discosta dal normale, è tipicamente aumentato e i tipi tipici di errore sono quindi:
- La concentrazione di elettroliti viene segnalata come normale o bassa quando è effettivamente pericolosamente alta, o
- La concentrazione di elettroliti viene segnalata come troppo bassa quando è effettivamente normale.
Quest’ultimo fenomeno è anche chiamato pseudoiponatriemia doveil sodio è interessato.,
L’aumento del contenuto di proteine e lipidi è il caso di una lunga lista di condizioni mediche comuni come diabete, fegato esindromi renali, alcolismo, ecc. A causa della sua grandezza, i medici possono portare a conclusioni errate pericolose per la vita e dovrebbero quindi essere presi in considerazione quando si valutano i risultati elettrolitici riportati dalla tecnologia ISE indiretta.
L’appendice A fornisce una spiegazione più approfondita con un esempio reale della differenza tra i risultati riportati dalla tecnologia ISE diretta e indiretta., L’appendice B fornisce un metodo su comecalcolare la differenza per un dato volume di solidi.
APPENDICE A – UN ESEMPIO
Come accennato in precedenza, l’ISE indiretto misura la concentrazione di elettroliti nel plasma, cioè la media ponderata tra la concentrazione dell’acqua contenente elettroliti e la proteina / lipide priva di elettroliti. Come conseguenza diquesto, il valore riportato dipenderà dal livello di proteine / lipidi.Questo non è il caso di ISE diretto che misura l’elettroliteattività nella parte acquosa del plasma.
Nella Tabella I, questo è illustrato da un esempio.,
Three samples are compared:
- Sample A (typical calibration solution) consists only of water, Fig. 2.
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FIG. 2 |
- Sample B (normal adult plasma sample) consists of 93 % water and 7 % lipid/protein, Fig. 3.
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FIG., 3 |
- Il campione C (plasma con aumento del livello lipidico) ha un volume proteico / lipidico pari al 15 %. Fico. 4.
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FIG. 4 |
Solo l’acqua contiene elettroliti, e tutta l’acqua è il sameconcentration di elettroliti indipendentemente dal fatto che l’acqua ispart del campione A, B o C, cioè i tre campioni hanno tutti la samelevel fisiologicamente.,
La tabella elenca i volumi e le concentrazioni che si applicano a una dimensione del campione di 100 µL. La concentrazione di sodio nell’acquaè stata fissata a 150 mmol/L = 150 nmol/µL di acqua.
Gli elettrodi direct-ISE calibrati su soluzioni acquose (e senza particolari correzioni) riportano la concentrazione delle ioni nella parte acquosa. In questo caso, riportano 150 nmol / µL di acqua per tutti e tre i campioni, riflettendo il fatto che le concentrazioni di sodio (attività) nelle tre parti dell’acqua sono uguali.,
La diluizione comporta il prelievo di un certo volume del campione totale,non solo dell’acqua, aggiungendo a questo un diluente prima di misurare la miscela risultante. Il numero totale di sodiumioni / atomi nel campione viene quindi espresso come concentrazione media nel volume totale del campione originale.
Come conseguenza di ciò, i valori riportati dipendono dal livello di proteine/lipidi dei campioni., Na (nmol) in sample
Average cNa+ in sample (nmol/µL)
= indirect ISE
TABLE I
Comparison between the direct ISE results and the dilution-methodresults shows that the difference increases with increasing volumeof non-electrolyte-containing protein/lipid., Ciò illustra anche che non è possibile correggere i risultati per concordare l’uno con l’altro, a meno che il volume relativo dell’acqua non sia determinato per ogni campione.
APPENDICE B – COME CALCOLARE LA DIFFERENZA PER UN DATOVOLUME DI SOLIDI
Secondo lo schema sopra, il fatto principaledeterminare l’entità della differenza è il volume relativodella proteina / lipide nel plasma. Viene mostrato un calcolo semplificatosulla Tabella II.,
TABELLA II
Esempio
Q: Qual è la differenza prevista tra il sodio resultsfrom un analizzatore di utilizzo indiretto ISE e un analizzatore utilizza directISE per una data concentrazione di sodio di 140 mmol/L di plasma, se theplasma proteina è: a) 70 g/L (normale), b) 40 g/L (visto spesso in ICUpatients) o c) 0 g/dL (visto in QC soluzioni o competenza testsamples)?
