What Is a Electron Microscopy (EM) and How Does It Work?
Aqui comparamos dois tipos básicos de microscópios – microscópios ópticos e eletrônicos.
O microscópio eletrônico usa um feixe de elétrons e suas características de onda para ampliar a imagem de um objeto, ao contrário do microscópio óptico que usa luz visível para ampliar imagens., Microscópios ópticos convencionais podem ampliar entre 40 a 2000 vezes, mas recentemente o que são conhecidos como microscópios de luz de “super Resolução” foram desenvolvidos que podem ampliar células biológicas vivas até 20.000 vezes ou mais. No entanto, o microscópio eletrônico pode resolver características que são mais de 1 milhão de vezes menores. microscópios eletrônicos (EMs) funcionam como suas contrapartes ópticas, exceto que eles usam um feixe focalizado de elétrons em vez de fótons para “imagem” da amostra e obter informações sobre sua estrutura e composição.,os passos básicos envolvidos em todos os EMs:
- uma corrente de elétrons de alta tensão (geralmente 5-100 KeV) é formada pela fonte de elétrons (geralmente um tungstênio aquecido ou filamento de emissão de campo) e acelerada em um vácuo em direção à amostra usando um potencial elétrico positivo.esta corrente é confinada e focada usando aberturas metálicas e lentes magnéticas num feixe monocromático fino e focalizado.este feixe é focado na amostra usando uma lente magnética.as interacções ocorrem no interior da amostra irradiada, afectando o feixe de electrões.,estas interacções e efeitos são detectados e transformados numa imagem.
no final do século XIX, os físicos perceberam que a única maneira de melhorar o microscópio de luz era usar a radiação de um comprimento de onda muito mais curto. J. J. Thompson em 1897 descobriu o elétron; outros consideraram suas propriedades ondulatórias., Em 1924, Louis deBroglie demonstrado que um feixe de elétrons viajando no vácuo se comporta como uma forma de radiação de comprimento de onda muito curto, mas foi Ernst Ruska que fez o salto para usar esses onda-como propriedades de elétrons para construir o primeiro EM e para melhorar o microscópio de luz.,arco de configurações: o microscópio eletrônico de transmissão (TEM) e o microscópio eletrônico de varredura (SEM); às vezes o TEM e SEM são combinados em um único instrumento, a análise de microscopia eletrônica de transmissão (TRONCO):
- TEM: aumenta de 50 para ~50 milhões de vezes; a amostra aparece televisão
- SEM: aumenta de 5 para ~ 500.000 vezes; imagens nítidas de características de superfície
- – TRONCO: aumenta de 5 para ~50 milhões de vezes; a amostra aparece televisão
a TEM, os elétrons do canhão de electrões passam através de uma lente condensadora antes de encontrar a amostra, perto da lente objetiva., A maior parte da ampliação é realizada pelo sistema de lentes objetivas. A imagem é vista através de uma janela na base da coluna e fotografada usando Filme, ou mais recentemente uma câmera CCD, levantando a tela de visualização fluorescente.no SEM, os elétrons do canhão de elétrons são focados para um ponto fino na superfície Da Amostra por meio do sistema de lentes. Este ponto é escaneado através da amostra sob o controle de correntes nas bobinas de varredura situadas dentro da lente final., Elétrons secundários de baixa tensão são emitidos a partir da superfície da amostra e são atraídos para o detector. O detector transmite sinais para um console eletrônico, e a imagem aparece em uma tela de computador.por vezes, os raios-x são detectados e utilizados para mostrar os elementos atómicos dentro das amostras. Isso pode ser muito útil na análise do conteúdo elementar celular ou sub-celular dos tecidos., Os Met e os mes equipados com detectores de raios-x são referidos como microscópios analíticos de elétrons (mea); análises usando tais instrumentos são descritas por vários termos, por exemplo, Microanálise de raios-x de Sonda Eletrônica (EPMA ou EPXMA) ou análise de raios-x de energia dispersiva (EDX). imagens tomográficas (3-dimensionais ou 3-D) podem ser obtidas inclinando e/ou girando o espécime ao adquirir uma imagem. Os recentes desenvolvimentos na fatiagem de partes muito finas de tecidos, e imagem da face do bloco de tecido, permitiram obter imagens sub-celulares de alta resolução em 3D.
